Les tests pour le coronavirus Covid2019

Pendant que des ministres se font tester et que nous on doit subir les fievres, les frissons, les maux de cranes et pire certains les insuffisances respiratoires progressives... et bien le test c'est pas de la magie, c'est de la routine pour des laboratoires...

Pendant que des ministres se font tester et que nous on doit subir les fievres, les frissons, les maux de cranes et pire certains les insuffisances respiratoires progressives... et bien le test c'est pas de la magie, c'est de la routine pour des laboratoires... l'extraction d'ARN est maitrisée depuis des dizaines d'années, la RT (reverse transcription cela date de la fin des années 80 en gros)... et la RT PCR ce sont des kit bien faciles à gerer...

Serions nous dans le cadre d'une pénurie de kit de RT PCR? Nos fournisseurs fabriquent ils aussi ces kits en Chine.

En tout cas, qu'Emmanuel Wargon se fasse tester est un scandale éthique d'une classe politique vivant sur le dos d'une France qui va au casse pipe et symboliquement aussi, au travers du carnage dans les Ehpad qu'on sort des chiffres de la mortalité...

 

 

RNA extraction

RNA was extracted from clinical samples with the MagNA Pure 96 system (Roche, Penzberg, Germany) and from cell culture supernatants with the viral RNA mini kit (QIAGEN, Hilden, Germany).

Real-time reverse-transcription PCR

A 25 μL reaction contained 5 μL of RNA, 12.5 μL of 2 × reaction buffer provided with the Superscript III one step RT-PCR system with Platinum Taq Polymerase (Invitrogen, Darmstadt, Germany; containing 0.4 mM of each deoxyribont triphosphates (dNTP) and 3.2 mM magnesium sulphate), 1 μL of reverse transcriptase/Taq mixture from the kit, 0.4 μL of a 50 mM magnesium sulphate solution (Invitrogen), and 1 μg of nonacetylated bovine serum albumin (Roche). Primer and probe sequences, as well as optimised concentrations are shown in Table 1. All oligonucleotides were synthesised and provided by Tib-Molbiol (Berlin, Germany). Thermal cycling was performed at 55 °C for 10 min for reverse transcription, followed by 95 °C for 3 min and then 45 cycles of 95 °C for 15 s, 58 °C for 30 s. Participating laboratories used either Roche Light Cycler 480II or Applied Biosystems ViiA7 instruments (Applied Biosystems, Hong Kong, China).

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